本发明公开了一种基于磁性纳米材料和生物信号放大技术测定T4多聚核苷酸激酶活性的方法,采用水热法制备Fe3O4@TiO2磁性核壳纳米粒子,ATP和T4 PNK存在时,滚环扩增反应引物链S1的5′端磷酸化,修饰到Fe3O4@TiO2磁性纳米粒子表面;加入环形模板S2,核酸链S2与Fe3O4@TiO2磁性纳米粒子表面引物链S1杂交形成环形混合物;Fe3O4@TiO2磁性纳米粒子表面发生RCA反应;加入二茂铁标记的核酸链S3,Fc‑S3与RCA反应产物杂交,被修饰到磁性纳米粒子表面,增强电化学响应信号;通过GME的磁性富集和电化学响应信号,实现对T4 PNK活性的高灵敏和定量测定。
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