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制备增强型单体细菌荧光素酶luxAB的方法

823   编辑:管理员   来源:北方有色网  
2023-03-19 08:08:39
本发明公开了一种制备增强型单体细菌荧光素酶luxAB的方法,先获得目的基因;构建重组表达载体;获得含重组表达质粒的表达菌种;诱导靶蛋白的表达及蛋白的纯化;检测纯化的增强型单体细菌荧光素酶的活性。本发明利用融合型荧光素酶其独特的优势,将luxA和luxB基因异二聚体荧光素酶基因融合并经过易错PCR突变和化学随机突变,筛选得到9个荧光强度增强的突变体,然后经过shuffling技术,得到一个增强型单体细菌荧光素酶基因luxAB,将其克隆到表达载体pET28a上,转化至BL21(DE3)菌株中表达,并用温和破碎法裂解细胞,纯化表达产物,得到增强型单体细菌荧光素酶,本发明的方法过程简单、生长周期短、成本低廉、易于纯化、酶活性损失小,性能稳定,具有重要的实际应用价值。
声明:
“制备增强型单体细菌荧光素酶luxAB的方法” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
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