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人羊膜间充质干细胞的分离纯化及鉴定方法

1125   编辑:管理员   来源:北方有色网  
2023-03-19 08:11:49
本发明公开了一种人羊膜间充质干细胞的分离纯化及鉴定方法,hAMSCs的分离方法为将人羊膜剪成碎片,用EDTA的胰蛋白酶,DNaseI的胶原酶分二步旋转消化,用钢网过滤,收集细胞滤液即为分离的原始hAMSCs;hAMSCs的纯化方法是原始hAMSCs用LG-DMEM培养基置于CO2培养箱培养,在倒置显微镜下除去完全未贴壁生长的羊膜上皮细胞,第3天更换新的培养基,待细胞汇合度达80~90%后,用胰蛋白酶—EDTA溶液消化收集细胞即可获得高纯度的hAMSCs;hAMSCs的鉴定方法采用免疫细胞化学染色波形蛋白和CK19以鉴别hAMSCs和羊膜上皮细胞,采用流式细胞术检测CD29、CD44、CD166、CD34和CD45的表达。本发明方法具有hAMSCs高收率、高活性、高纯度优点,鉴定方法简便、精准。
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“人羊膜间充质干细胞的分离纯化及鉴定方法” 该技术专利(论文)所有权利归属于技术(论文)所有人。仅供学习研究,如用于商业用途,请联系该技术所有人。
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